血中のグルコースの定量法として、次のような酵素反応を利用した方法がある。この方法では、波長340 nm の吸光度からグル…
薬学理論問題（物理） 第96問
血中のグルコースの定量法として、次のような酵素反応を利用した方法がある。この方法では、波長340 nm の吸光度からグルコースの濃度を求める。この方法に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。グルコース + ATP ─（ヘキソキナーゼ）→ グルコース︲6︲リン酸 + ADPグルコース︲6︲リン酸 + NADP⁺ ─（グルコース︲6︲リン酸デヒドロゲナーゼ）→ 6︲ホスホグルコン酸 + NADPH + H⁺
- (1)試料に入射する光と透過する光の強度をそれぞれI₀、I とすると吸光度はlog（I₀/I）で表される。
- (2)340 nm の波長の電磁波は、分子の振動状態の変化を直接引き起こす。
- (3)240 nm から400 nm までの吸収スペクトルを測定する場合には、ガラス製のセルが用いられる。
- (4)340 nm の吸収は、NADPH に由来する。
- (5)グルコース濃度は340 nm の吸光度の二乗に比例する。
正答 (1)(4)
正答は (1)と(4)。吸光度は A ＝ log (I₀／I) で表され、340 nm の吸収は生成した NADPH によるもので、NADP⁺ はこの波長をほとんど吸収しません。
グルコース1分子から NADPH が1分子できるので、340 nm の吸光度の増加からグルコースの量が分かります。ランベルト・ベールの法則により、吸光度は濃度に比例します。
A ＝ log (I₀／I) ＝ εcl（ε：モル吸光係数、c：濃度、l：層長）
【ほかの選択肢】
(2) 340 nm の紫外線は電子の状態の遷移（電子遷移）を起こす。分子の振動の状態を変えるのは赤外線 誤り
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(3) ガラスは約 320 nm より短い紫外線を吸収するので、紫外部の測定には石英のセルを用いる 誤り
(5) 吸光度は濃度に比例するので、グルコース濃度は吸光度の1乗に比例する 誤り
出典：第106回 薬剤師国家試験 問96（厚生労働省 公表）出典元ページ
最終更新日
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