ペニシリン耐性の黄色ブドウ球菌が発現するβ︲ラクタマーゼを精製し、反応速度論的解析を行った。β︲ラクタマーゼの反応は以下…

薬学理論問題(生物) 第115問

ペニシリン耐性の黄色ブドウ球菌が発現するβ︲ラクタマーゼを精製し、反応速度論的解析を行った。β︲ラクタマーゼの反応は以下のミカエリス・メンテン式に従うものとする。v = Vₘₐₓ ×[S]/(Kₘ +[S])異なる濃度のペニシリンを含む10 mL の反応液中に1 ng のβ︲ラクタマーゼを加え、反応生成物の量を測定したところ、ペニシリン濃度([S])と1 分間に生じる反応生成物の量(v)の関係は図1 のようになった。また、ペニシリン濃度の逆数(1/[S])と1 分間に生じた反応生成物量の逆数(1/v)をプロットしたところ、図2 のようになり、回帰直線の式は1/v = 75.0 × 1/[S] + 15.0であった。以下の記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。なお、測定中のペニシリン濃度の低下は無視できるものとする。

薬剤師 2024年(令和6年) 第115問の図(1/2)薬剤師 2024年(令和6年) 第115問の図(2/2)
正答 (3)(4)
正答は (3)と(4)。切片と傾きから Vmax≒0.067 nmol/mL・min、Km=5.0 μmol/L と求まり、競合阻害では見かけの Km が大きくなります。 ラインウィーバー・バークの式は次のとおりです。 1/v = (Km/Vmax) × 1/[S] + 1/Vmax Vmax = 1/15.0 = 0.0667 ≒ 0.067 nmol/mL・min Km = 75.0 × Vmax = 75.0/15.0 = 5.0 μmol/L (4) 競合阻害薬は基質と同じ部位を奪い合うので、Vmax は変わらず、見かけの Km が 5.0 μmol/L より大きくなります。
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【ほかの選択肢】 (1) β-ラクタマーゼは β-ラクタム環のアミド結合を加水分解する加水分解酵素。酸化還元酵素ではない 誤り (2) Vmax は酵素の量に比例するので、2 ng にすると単位時間あたりの生成物量は約2倍になる 誤り (5) 非競合阻害では Km は変わらず Vmax が小さくなるので、傾き Km/Vmax は大きくなる 誤り

出典:第109回 薬剤師国家試験 問115(厚生労働省 公表)出典元ページ

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