PCR 法の原理で正しいのはどれか。…

午後 第3問

PCR 法の原理で正しいのはどれか。

正答 (2)
正答は (2)。正しいのはこれです。 PCR は、増やしたい DNA の領域の両端に、それぞれ相補的に結合する2種類のプライマー(フォワードとリバース)を用います。2本のプライマーに挟まれた領域が、1サイクルごとに理論上2倍ずつ増えていきます。 【ほかの選択肢】 (1) 熱変性は60 ℃前後で行う 2本鎖 DNA を1本ずつに分ける熱変性は、94〜98 ℃程度で行います。60 ℃前後で行うのは、プライマーを結合させるアニーリングです 誤り (3) 増幅反応は50サイクル前後で行う 通常は25〜35サイクル程度です。増やしすぎると、目的以外の産物が増えたり、反応が頭打ちになったりします 誤り
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(4) 伸長反応は3′→5′方向に相補鎖を合成する DNA ポリメラーゼは、プライマーの3′末端にヌクレオチドをつなげていくので、合成は5′→3′の方向に進みます 誤り (5) 定量 PCR では標的 DNA 量が多いほど Ct 値が大きい Ct 値は、蛍光が決まった強さ(閾値)に届いたサイクル数です。初めの DNA が多いほど早く届くので、Ct 値は小さくなります 誤り 【1サイクルの流れ】 熱変性(94〜98 ℃)→ アニーリング(50〜65 ℃程度)→ 伸長(72 ℃前後、耐熱性 DNA ポリメラーゼ)

出典:2023年(令和5年) 臨床検査技師国家試験 問3(厚生労働省 公表)出典元ページ

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